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荧光显微镜照明在研究癌症抗原抗体在癌细胞巨噬细胞吞噬作用的应用

2022-11-02 浏览:53
CoolLED pE-300life光源的应用——使用癌症相关抗原的抗体研究癌细胞的巨噬细胞吞噬作用
Debbie Wilkinson 博士 – 阿伯丁大学(苏格兰)显微镜和组织学核心设施的高级显微镜应用专家。
 
阿伯丁大学的显微镜和组织学核心设施为各种研究小组以及外部客户提供支持,这意味着我们拥有广泛的设备来处理不同类型的样品。海洋实验室为我们带来了鲸脂和海水,其他样本包括纳米颗粒、酵母、蜜蜂和螨虫,以及标准的哺乳动物细胞。我们还致力于开发技术,例如使用我们的荧光显微镜的相关显微镜。
 

像许多成像设施一样,我们依赖传统的灯进行荧光显微镜照明。然而,当旋转圆盘共聚焦系统的灯泡出现故障时,Alan Tilley (Atlantic Imaging) 提供了一个CoolLED pE-300life照明系统作为临时措施。随着用户对其易用性、简单的开/关切换和 0-100% 辐照度控制的认可,照明系统变得流行起来。不需要更换灯泡也方便我们这些在工厂工作的人。因此,我们决定用 pE-300life(图 1)替换我们的广角荧光倒置显微镜上的灯。

 

图 1:Tatties*。 Zeiss Axio Observer Z1 和 CoolLED pE-300lite 照明系统,用于荧光和相差成像,配备电动滤光片、Zeiss 503 相机和长距离 x20 和 x40 物镜。

Tatties 是日常应用中使用非常频繁的主力系统,例如在应用其他技术(如共聚焦激光扫描显微镜)之前检查样品染色。一位用户是博士生 Ellen Main,她正在研究如何重新编程先天免疫系统以治疗恶性肿瘤——特别是针对卵巢癌。她的项目的主要目的是使用针对癌症相关抗原的抗体来增强卵巢癌细胞的巨噬细胞吞噬作用。作为其中的一部分,她一直在开发方法来确定抗体结合的更佳条件,并评估不同条件下的吞噬作用,如图 2 所示。CD14+ 单核细胞首先从外周血中分离出来,并在巨噬细胞出现之前培养了 5 到 7 天。然后用于吞噬作用测定。
 

图 2:优化用于研究卵巢癌免疫疗法的吞噬作用检测。比较非贴壁和贴壁靶标 OVCAR3(卵巢癌)细胞的分析优化。图像显示 CD14+ 巨噬细胞标记有 Cell Tracker Green(绿色),OVCAR3 细胞标记有 Cell Trace Far Red(红色)。用蓝色箭头标记的吞噬作用事件。使用 Zeiss Axio Observer Z1 和 CoolLED pE-300lite 照明系统(“Tatties”)获取的图像。由艾伦·梅恩 (Ellen Main) 提供。

CoolLED pE-300life光源简介:
 

pE-300 lite是一种用于显微镜的简单白光 LED 照明器。它提供了广泛的照明范围,涵盖了常见荧光团的激发波段,例如 DAPI、CFP、Aqua、FITC、TRITC、TxRed、Cy5 等等。操作是通过远程手动控制舱与即时开/关和辐照度控制从 0-100%。一系列用于荧光成像,光遗传学,电生理学和其他高速应用的LED照明系统,适用于荧光成像,光遗传学领域,电生理学领域和其他高速应用的LED照明系统

LED光源的寿命更长传统光源的亮度会随着使用而降低,这意味着照明效果会随着时间大打折扣。LED光源的寿命远远长过传统光源,且亮度在使用期间能够保持基本恒定,为用户提供稳定、可重复的照明。
 

pE-300lite专为市面上主流的荧光显微镜而设计,装置紧凑,价格实惠,适宜更多用途。

购买方便:为日常的荧光团研究提供照明,例如DAPI, FITC, TRIT和Cy5,符合常规的实验室耗材预算。

安装简便:可直接安装至显微镜的落射荧光端口,简单调整后,便可优化显微镜光源,一步到位。

使用简单:即时开关,可通过桌面控制终端优化亮度,减少样本损伤。

pE-300lite:简单的白光——易于购买、安装和使用。


 

规格

性能