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暗视野显微镜的原理及其应用

2022-10-14 浏览:45

子 ,分辨率可比普通显微镜高50倍。 
2、暗视野显微镜的作用:
  暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法。暗视野,顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线,它便于检查苍白的螺旋体。这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。
 早期皮肤粘膜损害(一期、二期霉疮)可查到苍白螺旋体。一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液中存在,肿大的淋巴结穿刺也可检出。二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出,但以皮肤检出率zui高。早期先天性梅毒,可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体。zui近,通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水,以其作暗视野显微镜观察,对先天性梅毒有诊断价值。
  暗场法观察的显微镜适用于在普通显微镜下看不见的微小活体,不染色生物体样品标本,观察其形状和轮廓。广泛适用于科研、教学、医疗、防疫和农牧等行业。
  暗场显微镜实际上即是暗场照明法(在生物学上应用的是透射式照明中的一种斜射照明法).它的特点和明场不同,不直接观察到照明的光线,而观察到的是被检物体反射或衍射击光线.因此,视场成为黑暗的背景,被检物体则呈现明亮的象.
  根据光学上的丁道尔现象,微尘细粒在强光直射通过的情况下,不能为人眼所见,这是因为光线过强及绕射现象等因素,因而看不到微尘的形象.若把光线斜射它们,则由于光的反射或衍射的结果,微尘细粒似乎增大了体积,而为人眼可见.暗视场镜检术便是利用这一原理而设计出来.
  暗场显微镜的结构与明场显微镜基本相同,只是采用的是暗场聚光镜.暗场聚光镜的特点是不让光束由下至上的通过被检物体,而是将光线改变途径,使其斜射投向被检物体,使照明光线不直接进入物镜,利用被检物体表面反射或衍射光而形成的明亮的图象.因此,在暗场镜检时.只能观察到物体的存在,运动及外部形态,而很难分辨其内部结构.
  暗场显微术的优越性,在于能观察到在明场下观察不到的极其微小的物体.前己述及,在明场中心照明的油浸物体的情况下,zui高分辨率为0.4um;而在暗场情况下,其分辨率可一检物体,为0.02-0.004um.因此,暗场显微术又称---超显微术.
  暗场镜检要求载玻片和盖玻片必须无疵痕而无尘土,物镜前透镜也必须清洁无尘.载玻片与盖玻片的厚度应符合标准,载玻片太厚,则聚光聚的焦点落在载玻片内,而达不到被检物体的平面上,盖玻片太厚,在使用油镜头的情况下,由于物镜的工作距离很短,甚至无法调焦,而看不到或看不清被检物体.